服务热线:027-87772229

MMA Focurose 6HF(复合型离子交换,去聚体优选)

价 格:询价

规 格:25ml

产 地:中国

货 号:HY1006-4

品 牌:汇研生物

使用说明:索取使用说明

索取报价

产品介绍

MMA Focurose 6HF

    为确保产品的性能和无忧的操作,使?#20204;?#35831;仔细阅读本手册,有任?#25105;晌是?#21672;询本公司售后技术支持或当地的销售人?#20445;?#32852;系方式见附录)。

1.产品介绍

MMAFocurose 6HF是一种多模式生物分离介质,主要应用于单抗的中度纯化和精?#22797;?#21270;(用于去除ProteinA纯化后样?#20998;?#30340;Protein A*、二聚体、多聚物、宿主细胞蛋白、核酸),也可以应用于其它生物分子的精?#22797;?#21270;(去除二聚体、多聚物、宿主细胞蛋白、核酸等)。

 

图1:MMA Focurose 6HF的配基是一种多模式配基,它?#32957;?#26631;分子存在许多类型的相互作用,主要是离子作用(强阴离子作用),其次是氢键作用和疏水作用等。

特点如下:

a.在高电导条件下结合带电分子,样本不再受电导的限制,样本不需要前处理就可进行离子交换。

b.载量高,采用流穿模式?#26412;?#26377;更高处理量。

c.和传统离子交换介质相比,具有新的选择性。

表1:性能?#38382;?/span>

名称

MMA Focurose 6HF

基质

高刚性琼脂糖

粒径范围

45-165μm

平均粒径

90μm

介质类型

强阴离子交换

离子载量

90-120umol Cl-/ml 介质

pH稳定性

2-14(短期)4-12(长期)

操作压力

0.5MPa

流速

1000cm/h

化学稳定性

所有常用缓冲液、1.0M氢氧化钠、1.0M乙酸、8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇

避免使用氧化剂、阴离子去污剂

贮存溶液

20%乙醇

贮存温度

4-30

 2.离子交换介质的选择

图2:离子交换介质的选择


说明:

a.目标物所在溶液的pH?目标物的等电点?#20445;?#36873;择阳离子交换介质。

b.当目标物所在溶液的pH?目标物的等电点?#20445;?#36873;择阴离子交换介质。

c.选择离子交换介质?#20445;?#25152;有使用溶液的pH应该在离子交换介质的使用pH范围?#38405;凇?/span>

d.选择离子交换介质?#20445;?#25152;有使用溶液的pH、盐的种类、盐的浓度必?#32957;?#32500;持目标物的活性,避免目标物过酸/过碱水解、沉淀等情况。

3.缓冲溶液的选择

表2?#21644;?#33616;缓冲液

pH范围

缓冲盐

浓度(mM)

4.0-5.0

Acetate

20-100

4.0-6.0

Citrate

20-200

5.5-6.5

Bis-Tris

20-50

6.0-7.5

Phosphate

50-200

7.5-8.5

Tris

20-50

8.5-

Glycin-NaOH

20-100

 说明:

a.必须严格按照表2的要求选择缓冲溶液的种类和浓?#21462;?/span>

b.错误的缓冲液(种类和浓度)会干扰分离效果,具体体现在影响分离?#21462;?#31163;子交换介质的载量、分离纯化过程中的pH波动等。

c.选择离子交换介质?#20445;?#25152;有使用溶液的pH应该在离子交换介质的使用pH范围?#38405;凇?/span>

d.所有缓冲液试剂必须使用分析纯或者更高纯度的试剂。

e.在溶液配制后,须经过滤(粒径≤45μm0.22μm过滤粒径≤165μm0.45μm过滤粒径≤300μm0.8μm过滤,避免堵塞离子交换介质)和脱气处理(影响分离效果)

 4.纯化模式的选择

    按纯化模式可以分为?#20309;?#38468;模式(目标物吸附,杂质流穿)和流穿模式(目标物流穿,杂质吸附)。

备注:建议优先选择流穿模式(具有更高的处理量,例如单抗的中度纯化和精?#22797;?#21270;),特殊情况下选择吸附模式。

 5.样品的制备

a.调节样品的pH(低浓度的弱酸/弱碱滴定或者进行缓冲液置换),检测样?#20998;?#30340;电导

b.样品过滤(粒径≤45μm0.22μm过滤、粒径≤165μm0.45μm过滤、粒径≤300μm0.8μm过滤,避免堵塞离子交换介质)。

备注:不建议直接?#20204;?#37240;或强碱调整样品溶液的pH,可能会出现目标物的降解和失活;可以用凝胶过滤(G25)、透析、超滤的方法进行缓冲液置换。

 6.清洗

清洗后可以去除一些强结合性物质(例如一些强结合的蛋白、变性蛋白、脂类等),从而达?#20132;?#22797;介质的优良性能(例如载量、流动性、柱效等)。

建议每使用5次后进行一次清洗,具体清洗频?#24066;?#26681;据纯化的初始样品的洁净度进行调整。

a.20柱体积的0.1M NaAc pH 3.0 洗后,再用20倍柱体积纯化水冲洗。

    备注:用于去除强离子结合物质。

b.用10倍柱体积1M NaOH冲洗后,静置0.5-1小?#20445;?#20877;用纯化水冲洗至中性。

    备注:用于去除聚集在介质中的蛋白质沉淀、脂类和变性物质。

c.用5-10倍柱体积的20%乙醇冲洗后保存。

    备注:20%乙醇可以防止微生物的生长,20%乙醇保存的介质可以在4-30℃(4-8℃更佳)保存。

7.常见问题

表3:常见问题及解决方案

问题

可能原因

解决方案

流穿模式下,杂质不与介质结合或结合量?#31995;?/span>;吸附模式下,目标物不与介质结合或结合量?#31995;?/span>

1.上样?#25239;?#36733;

降低上样量

2.上样速度过快

降低上样流速

3.蛋白或脂类在介质中聚

及时有效地清洗介质或更换新的介质

4.杂质或目标物不带电或与介质带同样的电荷

筛选合适的结合缓冲液

5.样?#20998;?#21152;入了不合适的去污剂

检查样?#20998;?#26159;否有不合适的去污剂

6.结合条件不佳

优化结合条件(pH和电导)

吸附模式下,洗脱时没有收集到目标物

 

1.目标物没有与介质结合或结合量较少

?#28909;?#35748;目标物是否与介质结合

2.洗脱条件不合适

洗脱?#21512;?#33073;能力不够,调整洗脱液pH或加大?#38395;?#24230;

3.洗脱时间不够

降低流速,延长洗脱液的保留时间

4.洗脱体积过小

加大洗脱体积

5.目标物在洗脱液条件下出现聚集沉淀

检测目标物在洗脱液条件(?#38395;?#24230;和pH)下的溶解度和稳定性。

目标物纯度?#31995;?/span>

 

1.样品没有经过前处理

样品上柱前必须要经过离心或过滤

2.样品粘度过高

用?#33014;?#28082;适当的稀释样品,降低粘?#21462;?/span>

3.吸附模式下,洗杂不彻底

加大洗杂体积直至基线平稳并与?#33014;?#28082;一致

4.杂质蛋白或脂类在介质中聚集沉淀

及时有效地清洗介质

5.吸附模式下,洗脱条件不佳

优化洗脱条件

6.目标物出现降解

检测目标物的稳定性

7.柱料装填效果不佳

重新装填或购买

8.分离柱顶部有?#27927;?#20648;样体积

重新装柱或降低储样体积

9.介质中有微生物生长

介质使用完后,请及时正确保存介质

10.流穿模式下,杂质结合条件不佳

优化纯化工艺条件

介质载量下降

1.上样速度过快

降低上样流速

2.蛋白或脂类在介质中聚集,导致载量下降。

及时清洗介质

3.使用?#38382;?#36807;多,配基被氧化或脱落

及时清洗介质或更换新介质

色谱峰上升缓慢

介质装填过紧

重新装柱

色谱峰拖尾

介质装填太松

重新装柱

柱床有裂缝或干涸

出?#20013;?#38706;或大体积气泡引入

检查管路是否有泄露或气泡,重新装柱

液流?#19979;?/span>

1.蛋白或脂类聚集

及时清洗介质或?#22235;?/span>

2.蛋白沉淀在介质中

调整?#33014;庖汉?#27927;脱液组分,以维持目标物的稳定性和介质的结合效率

3.分离柱中微生物生长

所用试剂必须经过过滤和脱气;

样品上柱前必须离心或过滤

 

8.订购信息

表4:订购信息表

产品

规格(ml)

货号

MMA Focurose 6HF

25

HY1006-4

MMA Focurose 6HF

100

HY1006-4

MMA Focurose 6HF

500

HY1006-4

MMA Focurose 6HF

1000

HY1006-4

备注:大规格包装产品或其它产品购买,请咨询本公司当地销售或售前技术支持。

9.联系方式

武汉汇研生物科技股份有限公司

地址:武汉市东湖新技术开发区流芳园?#19979;?8号新特工业园

电话:027-8777 2229

网址:www.kw830.com

邮箱:[email protected]




在线咨询
切尔西vs巴黎圣日耳曼
新时时模拟器 老时时彩走势图 一分钟极速赛车开奖网站 秒速稳赚两千 湖北体彩11选五技巧 重庆时时老五星走势图 街机电玩捕鱼游戏机厂家 黑龙江时时彩全国开奖 赛车冠军号赢钱技巧 好游戏推广平台 087期玄机图 刮刮乐编码的秘密 pk10走势图下载 重庆时时苹果软件 老时时的结果 bbin电子平台官网