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Focudex G-25 Medium(生物大分子脱盐专用)

价 格:询价

规 格:25g

产 地:中国

货 号:HC2007

品 牌:汇研生物

使用说明:索取使用说明

索取报价

产品介绍

Focudex G-25 Medium

为确保产品的性能和无忧的操作,使用前请仔细阅读本手册,有任?#25105;晌是?#21672;询本公司售后技术支持或当地的销售人?#20445;?#32852;系方式见附录)。 

1.产品介绍

Focudex G-25 Medium 是根据介质的交联程度不同,溶胀后的粒径和孔径的大小而对不同分子量生物分子进行分离纯化,主要用于样品的脱盐、缓冲液置换及小分子杂质去除。

特点如下:

a.操作简便(既可?#26434;?#27880;射器或泵连接,也可以以重力柱的方式进行)、迅速(5-25min内?#32431;?#23436;成)。

b.效果显著(脱盐率>98%)。

c.回收率高(蛋白回收率≥85%-95%)。

d.?#23376;?#25918;大(可以根据需求进行多个串联及其它大规格层析柱的装填)。 

表1:性能?#38382;?/strong>

基质

葡聚糖

干粉粒径

45-165μm

溶胀度

4-6ml/g

排阻限(球蛋白)

5kDa

pH稳定性

2-13

外水体积

30% CV*

样品加载体积

5%-30% CV*

化学稳定性

所有常用的缓冲液

最大流速

150cm/h

操作压力

0.3MPa

贮存溶液

20%乙醇(溶胀后介质)

贮存温度

4-30

*:CV指柱体积。

2.使用(以HT 5ml为例,具体使用效果见案例一)

说明:本公司此产品以干粉?#38382;?#20445;存和发货,称取适量干粉用8-10倍干粉体积的纯化水溶胀过夜(或沸水溶胀1h以上),装柱后?#32431;?#20351;用。

a.水洗

用2-5倍柱体积纯化水以1.0-10.0ml/min清洗介质

备注:此步骤用清洗(第一次使用)或去除介质中20%乙醇(重复使用)。

b.?#33014;?/span>

用2-5倍柱体积?#33014;?#28082;以1.0-10.0ml/min?#33014;?#20171;质

备注:此步骤用于?#33014;?#20171;质,保证介质中充满?#33014;?#28082;。

c.上样

样本经过离心、过滤(0.45um)后以1.0-10.0ml/min进行上样。

备注:样品必须经过离心、过滤处理,上样体积为0.25-1.5ml。

d.洗脱

用2-5倍柱体积洗脱液以1.0-10.0ml/min进行洗脱,并收集洗脱液。

备注:选择合适的收集时间段,收集时间段的选择对回收率和脱盐率有一定的影响。

e.水洗

用2-5倍柱体积纯化水以1.0-10.0ml/min清洗介质。

备注:此步骤用于去除介质中的洗脱液。

f.保存

用2-5倍柱体积 20%乙?#23478;?.0-10.0ml/min清洗介质后保存。

备注:20%乙醇可以防止微生物的生长,20%乙醇保存的介质可以在4-304-8℃更佳)保存。

g.溶液配制

?#33014;?#28082;/洗脱液:?#33014;庖汉?#27927;脱液为同一种溶液,根据客户需求进行配制。

备注:建议在目标溶液中加入一定浓度的盐(至少0.025 M)用来抑制样本和介质的离子相互作用;当盐浓度>1.0 M ?#20445;?#30095;水性样本会与介质有轻微的结合;在更高浓度的盐(>1.5 M )?#20445;?#20171;质会有轻微的收缩。

 

备注:

当使用重力柱和注射器操作?#20445;?ml/min≈100-120滴/min。 

3.清洗

清洗后可以去除一些强结合性物质(例如一些强结合的蛋白、变性蛋白、脂类等),从而达?#20132;指?#20171;质的优良性能(例如载量、流动性、柱效等)。

建议每使用5-10次后进行一次清洗,具体清洗频?#24066;?#26681;据纯化的初始样品的洁净度进行调整。

a.5-10倍柱体积低浓度离子型或非离子型去污?#31890;?#22914;0.5%Triton X-100)冲洗后,立即用5-10倍柱体积纯化水冲洗。

备注:用于去除疏水结合物质。

b.用5-10倍柱体积8M 尿素或6M盐酸?#39029;?#27927;后,立即用5-10倍柱体积纯化水冲洗。

备注:用于去除聚集在介质中的沉淀或变性物质。

c.用5-10倍柱体积的0.2MNaOH冲洗后,立即用纯化水冲洗至pH为中性。

d.用5-10倍柱体积的20%乙醇冲洗后保存

备注:20%乙醇可以防止微生物的生长

4.应用案例

案例一


备注:由案例一可知,上样量为30%?#20445;?#33073;盐效果无影响。

表2:案例一使用效果的相关数据

上样体积(ml)

收集体积(ml)

稀释倍数

脱盐率*(%)

回收率**(%)

0.5

1.2-1.5

2.4-3.0

>99

>85

1.0

1.8-2.0

1.8-2.0

>98

>90

1.5

2.0-2.4

1.3-1.6

>96

>95

备注:

*脱盐效果的高低主要取决于收集样本的时间段和上样的体积。

**回收率的主要取决于样本的性质、收集样本的时间段、以及测量误差(当样本浓度过低?#20445;?#27979;量误差较大)。

案例二


备注:由案例一和案例二?#21592;?#21487;知,上样量为30%且流速为5ml/min?#20445;?#33073;盐效果无影响。。

案例三


备注:由案例三可以看出流速的变化(在介质可耐受的流速?#27573;?#20869;)?#38405;?#26631;样本的浓?#21462;?#22238;收率、稀释倍数均无影响,仅对脱盐率有轻微的影响。

5.常见问题

表3:常见问题及解决方案

问题

可能原因

解决方案

回收率低

1.开始收集时间过晚或停止收集时间过早

正确及时的收集目标物

2.样本与介质发生疏水作用

提高上样流速或降低洗脱流速

3.样本浓度过低

洗脱后样本被稀释,检测误差增大

4.脱盐后目标物质溶解度降低或在等电点附近聚集

适当提高洗脱液中盐浓度或调整合适的pH?#27573;?/span>

5.样品没有经过前处理

样品上柱前必须要经过离心或过滤

6.介质装填效果不佳

重新装填

7.分离柱顶部有较大储样体积,造成目标物洗脱时间延迟

重新装填或购买

8.长期使用后蛋白或脂类在介质中聚集沉淀,造成目标物洗脱时间延迟或残留

及时有效地清洗介质

9.介质中有微生物生长

介质使用完后,请及时正确保存介质

脱盐效果差

1.停止收集时间过晚

正确及时的收集目标物

2.上样体积略大

适当的降低上样体积或上样浓度

3.样品没有经过前处理

样品上柱前必须要经过离心或过滤

4.介质装填效果不佳

重新装填

5.分离柱顶部有较大储样体积,造成目标物洗脱时间延迟

重新装填或购买

6.长期使用后蛋白或脂类在介质中聚集沉淀,造成目标物洗脱时间延迟

及时有效地清洗介质

7.介质中有微生物生长

介质使用完后,请及时正确保存介质

色谱峰上升缓慢

介质装填过紧

重新装柱

色谱峰拖尾

介质装填太松

重新装柱

柱床有裂缝或干涸

出?#20013;?#38706;或大体积气泡引入

检查管路是否有泄露或气泡,重新装柱

液流?#19979;?/span>

1.蛋白或脂类聚集

及时清洗介质或?#22235;?/span>

2.蛋白沉淀在介质中

调整?#33014;庖汉?#27927;脱液组分,以维持目标物的稳定性和介质的结合效率

3.分离柱中微生物生长

所用试剂必须经过过滤和脱气;

样品上柱前必须离心或过滤

6.订购信息

表4:订购信息表

产品

规格(g)

货号

Focudex G-25 Medium

25

HC2007

Focudex G-25 Medium

100

HC2007

Focudex G-25 Medium

500

HC2007

备注:大规格包装产品或其它产品购买,请咨询本公司当地销售或售前技术支持。

7.联系方式

武汉汇研生物科技股份有限公司

地址:武汉市东湖新技术开发区流芳园?#19979;?8号新特工业园

电话:027-8777 2229

网址:www.kw830.com

邮箱:[email protected]


 



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